常用玻璃器材的准备

微生物实验室内应用的玻璃器材种类甚多，如吸管、试管、烧瓶、培养皿、培养瓶、毛细吸管、载玻片、盖玻片等，在采购时应注意各种玻璃器材的规格和质量，一般要求能耐受多次高热灭菌，且以中性为宜。玻璃器皿用前要经过刷洗处理，使之干燥清洁，有的需要无菌处理。对于每个从事微生物工作的人员应熟悉和掌握各种玻璃器皿用前用后的处理。现将玻璃器皿的种类及其准备列述如下：
一、常用玻璃器皿的种类及要求
（一）试管  用于细菌及血清学试验的试管应较坚厚，以便加塞不致破裂。常用的规格有：
1.2～3×65mm，  用于环状沉淀试验；
2.11～13×100mm，用于血清学反应及生化试验等；
3.15×150mm，用于分装5～10ml的培养基及菌种传代等；
4.25×200mm，用于特殊试验或装灭菌滴管等。
（二）三角烧瓶  底大口小，放置平稳，便于加塞，多用于盛培养基、配制溶液等。常用的规格有50、100、150、250、500、1000、2000、3000、5000ml等。
（三）培养皿为硬质玻璃双碟，常用于分离培养。盖与底的大小应合适。盖的高度较底稍低，底部平面应特别平整。常用的规格（以皿盖直径计）有：90mm，75mm，60mm等。
（四）吸管  用于吸取少量液体。常用的吸管有两种；一种为无刻度的毛细吸管；另一种为有刻度吸管。管壁有精细的刻度。一般长为25厘米。常用的容量为0.2、0.5、1.0、2.0、5.0及10ml。
（五）量简、量杯  用于液体的测量。常用规格为：10、20、25、50、100、200、500、1000及2000ml。
（六）烧杯  常用的规格50～3000ml容量，供盛液体或煮沸用。
（七）载玻片及盖玻片，载玻片供作涂片用，常用的规格为75×25mm，厚度为1～2mm。另有凹玻片可供作悬滴标本及作血清学试验用。盖玻片为极薄的玻片，用于标本封闭及悬滴标本等。有圆形的，直径18mm；方形的18×18或22×22mm；长方形的22×36mm等数种。
（八）离心管  常用规格有10、15、100及、250ml等数种，供分离沉淀用。
（九）试剂瓶  有磨纱口，有盖，分广口和小口两种，容量自30～1000ml不等，视需要量选择使用。分棕色、无色两种，为贮藏药品和试剂用，凡避光等药品试剂均宜用棕色瓶。
（十）玻璃缸  缸内常颈置石炭酸或来苏儿等清毒剂，以备放置用过的破片、吸管等。
（十一）染色缸  有方形和圆形两种，可放载玻片6～10片，供细菌、血液及组织切片标本染色用。
（十二）滴瓶  有橡皮帽式管滴和玻塞式，分白色和棕色，容量有30ml和60ml等，供贮存试剂及染色液用。
（十三）漏斗  分短颈和长颈式两种。漏斗直径大小不等，视需要而定。分装溶液或上垫滤纸或纱布、棉花作过滤杂质用。
（十四）注射器  有0．25ml、0．5ml、1ml、2ml、5ml、10ml、20ml、50ml和100ml等。供接种试验动物和采血用。
（十五）下曰瓶  有龙头和无龙头两种。容量有2500～20000ml不等。存放蒸馏水或常用消毒药液，也可作细菌涂片染色时冲洗染液用。
除上述外，还有发酵管、玻璃棒、酒精灯、玻璃珠以及蒸馏水瓶等玻璃器材。
二、一般玻璃器皿的准备
（一）新购入玻璃器皿的处理，新购玻璃器皿常附有游离碱质，不可直接使用，应先在2％盐酸溶液中浸泡数小时，以中和碱性，然后用肥皂水及洗衣粉洗刷玻璃器皿之内外，再以清水反复冲洗数次，以除去遗留的酸质，最后用蒸馏水冲洗。
（二）用后玻璃器皿的处理，凡被病原微生物污过的玻璃器皿，在洗涤前必须进行严格的消毒后，再行处理，其方法如下：
1．一般玻璃器皿（如平皿、试管、烧杯、烧瓶等）均可置高压灭菌器内15磅20～30分钟灭菌。随即趁热将内容物倒净，用温水冲洗后，再用5％肥皂水煮沸5分钟，然后按新购入产品的方法同样处理。
2．吸管类使用后，投入2％来苏儿或5％石炭酸溶液内48小时，以使其消毒，但要在盛来苏儿溶液的玻璃简底部垫一层棉花，以防投入吸管时损破。吸管洗涤时，先浸在2％肥皂水中1～2小时，取出，用清水冲洗以后再用蒸馏水冲洗。
3．载玻片与盖玻片用过后，可投入2％来苏儿或5％石炭酸溶液，取出煮沸20分钟，用清水反复冲洗数次，浸入95％酒精中备用，再次使用时在火焰上烧去酒精，用此法洗涤和保存的载玻片及盖玻片清洁透亮、无水滴。若载玻片与盖玻片滴有香柏油，需先用擦镜纸拭去或滴加二甲苯摇晃，待油垢溶解后再消毒处理。
各种玻璃器材若用上述方法处理，尚未达到清洁目的，则可将其浸泡于下述清洁液中过夜，取出后用水反复冲洗数次，最后用蒸馏水冲洗。
附：清洁液的配制方法
重铬酸钾  60g  硫酸  60ml
自来水  100ml
此液可连续使用，直至液体变绿后不再使用。此种清洁液内含有硫酸，腐蚀性很强，使用时应注意对衣服和皮肤的灼损。
凡含油脂如凡士林、石腊等的玻璃器材，应单独进行消毒及洗涤，以免污染其它的玻璃器皿。这种玻璃器材于未洗刷之前须尽量去油，然后用肥皂水煮沸趁热洗刷，再用清水反复冲洗数次，最后用蒸馏水冲洗。
（三）玻璃器皿的干燥 
1．晾干  不急用的，要求一般干燥，可在无尘处倒置晾干水分，待自然干燥。可用安有斜木钉的架子和带有透气孔的玻璃柜放置玻璃器皿。
2．烘干  洗净的玻璃器皿控去水分，放在电烘箱中烘干，烘箱温度为105~120℃烘1h左右。亦可放在红外灯干燥箱中烘干。带有实心玻璃塞的及厚壁玻璃器皿烘干时要注意慢慢升温，且温度不可过高，避免烘裂，量器不可放于烘箱中烘。硬质试管可用酒精灯烘干，要从底部烘起，把试管口向下，以免水珠倒流把试管炸裂，烘到无水珠时，把试管口向上赶净水汽。
3．热（冷）风吹干  对于急于干燥的仪器或不适合放入烘箱的较大的玻璃器皿可用吹干的方法，通常用少量乙醇、丙酮（或最后再用乙醚）倒入已控去水分的玻璃器皿中摇洗，随即控净溶剂（溶剂用后回收），用电吹风吹，开始用冷风吹1~2min，当大部分溶剂挥发后吹入热风至完全干燥，再用冷风吹残余的蒸汽，使其不再冷凝在容器 内。此法要求通风好，防止中毒，不可接触明火，以防有机溶剂爆炸。
 
 
 
玻璃器材洗净后，通常倒置于干燥架上，令其自然干燥，必要时亦可放于干烤箱中50℃左右烤干，以加速其干燥，温度不宜太高，以免玻璃器皿碎裂。干燥后以干净的纱布或毛巾拭去干后的水迹，以备作进一步处理应用。
（四）玻璃器皿之包装  玻璃器皿在消毒之前，须包装妥当，以免消毒后又为杂菌所污染。
1. 一般玻璃器材（试管、三角瓶、烧杯等）的包装，用做好适宜大小的棉塞，将试管或三角烧瓶口塞好，外面再用纸张包扎，烧杯可直接用纸张包扎；
2．吸管的包装用细铁丝或长针头塞少许棉花于吸管口端，以免使用时，将病原微生物吸入口中，同时又可滤过从口中吹出的空气。塞进的棉花大小要适度，太松太紧对其使用都有影响。最后，每个吸管均需用纸分别包卷，有时也可用报纸每5～10支包成一束或装入金属简内进行干烤灭菌；
3．培养皿、青霉素瓶、乳钵等包装，用无油质的纸将其单个或数个包成一包，置于金属盒内或仅包裹瓶口部分直接进行灭菌。
附：棉塞的制作：制作棉塞，最好选择纤维长的新棉花，绝不能用脱脂棉，其制法视试管或瓶口的大小取适量棉花，分成数层。互相重叠，使其纤维纵横交叉，然后，折叠卷紧，用两层纱布捆系结实，做成长约4～5cm的棉塞。良好的棉塞上下粗细一样，并且与管口紧接，没有可见空隙。
（五）玻璃器材的灭菌  玻璃器材干燥包装后，均置于干热灭菌器内，调节温度至160℃维持1～2小时进行灭菌，灭菌后的玻璃器材，须在1周内用完，过期应重新灭菌，再行使用。必要时，也可将玻璃器材用油纸包装后，用121℃高压蒸气灭菌20～30分钟。
三、供组织培养用的璃破器皿及其它器皿的清洗、包装与消毒
（一）清洗  不论新购置的或用过的玻璃器皿，都必须首先浸泡于粗硫酸（有的实验室用清洁液）中过夜（清洁液的配方是：先将102克重铬酸钾与常水100ml相混合，加热使成饱和溶液，然后按每35ml饱和溶液加粗制浓硫酸1000ml即成），次日取出用自来水浸泡4～6小时后，再用自来水冲洗10次（不得少于10次）或用流水冲洗5分钟（清洁液浸饱的应适当延长）；最后蒸馏水冲洗6次（双蒸馏水冲洗3次即可，放入温箱中干燥即可包装。
（二）包装  吸管和移液管首先在管口塞入普通棉花少许（不得过紧或过松），用麻纸包扎后，装入玻璃简灭菌；培养瓶在塞好软木塞后，外面用牛皮纸包扎；平皿分别用牛皮纸包裹；中试管以4～6支用方形牛皮纸包裹在一起，进行灭菌。代用的链霉素小瓶，可直接放人铝饭盒内灭菌。
（三）灭菌  包装好的玻璃器皿，均以于热灭菌，100℃维持2～3小时。灭菌过的器皿，必须在一周内用完，过期应重新灭菌。
（四）翻口橡皮塞的准备，一般经肥皂水煮沸20分钟后，流水冲洗10次，再以蒸馏水冲洗2次后，用双蒸馏水浸泡于玻璃缸中备用。使用前煮沸消毒15分钟，亦可取出晾干包装高压灭菌灭菌后使用。
四、毛细管的制备
取直径5mm长约10厘米的中性硬质玻璃，两端各塞以棉花，包扎灭菌后两手持管之两端，将其中段置于喷灯上烧灼，待其赤热熔化时，即离开火焰，向两端抽长，即成毛细管。